Instrumentet for elektronisk telling kan brukes til både røde og hvite blodceller. Blodet må fortynnes i en isoton saltløsning. Det er omtrent 1000 ganger flere røde enn hvite blodceller, så de må fortynnes mer.
20 µL fullblod (engangs-glasspipetter) blandes godt ut i 10 mL saltvann. 20 µL av blandingen fortynnes videre med nye 10 mL saltvann. Vi har stilt inn instrumentet til å telle alle cellene i 100µL prøve.
Instrumentet vi bruker til telling av erytrocytter på Blodkurs 1 er en Coulter counter. Metoden ble viktig i utviklingen av flowcytometer, og det finnes flowcytometre i dag som bygger på Coulter-prinsippet. Så lenge blodprøvetakingen og fortynningen er korrekt utført er metoden nøyaktig. Dere trenger bare enkeltmålinger av erytrocytter/L, men merk dere eventuelle feilkilder. Glasskyvettene som skal måle opp 20µL må være helt fulle, og uten luftbobler. Det gjelder både fra kapillærpunksjon og ved fortynning.
Referanseområde for Erytrocytter:
3,9 - 5,2 x1012/L for kvinner, 4,3 – 5,7 x1012/L for menn.
Referanseområde for Leukocytter:
3,5 – 11,0 x109/L
Ettersom det er så mange flere erytrocytter enn leukocytter, ser vi bort fra at noen av cellene i 100µL fortynnet løsning er leukocytter. Ved beregning av røde blodceller i fullblod, og avrunding, vil de ikke telle med. Når vi skal telle hvite blodceller må erytrocyttene lyseres først.
De røde blodcellene må fortynnes 250 000 ganger (500x først, og deretter en 500x fortynning av fortynningen). Hvordan påvirker fortynningen metodens nøyaktighet?
Erytrocyttkonsentrasjonen er oppgitt i celler/100µL i fortynnet løsning. Du må selv regne ut verdien i fullblod per liter (som i referanseområdet). Medianen av disse skal brukes sammen EVF til å beregne MCV, gjennomsnittlig volum (i liter) for en erytrocytt.